兔原代少突膠質(zhì)原代細(xì)胞
商品屬性:
規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 | 貨號(hào) | EY-XY3954 |
種屬來源 | 兔 | 組織來源 | 腦 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) | 形態(tài)特征 | 圓形或橢圓形 |
形態(tài):圓形或橢圓形
培養(yǎng)基:兔少突膠質(zhì)細(xì)胞wan全培養(yǎng)基
培養(yǎng)環(huán)境:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
傳代特征:可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
細(xì)胞基本屬性:
種屬來源:兔
組織來源:腦腦
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:
產(chǎn)品貨期:5-6周
運(yùn)輸方式:T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制:僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹::少突膠質(zhì)細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中膠質(zhì)細(xì)胞的重要組成部分,其主要功能是包繞神經(jīng)元的軸突形成髓鞘,協(xié)助神經(jīng)電型號(hào)的跳躍式高效傳遞,維持和保護(hù)神經(jīng)元的正常功能。此外,少突膠質(zhì)細(xì)胞還具有合成和分泌多種細(xì)胞因子來促進(jìn)神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的發(fā)育和存活等功能。
原代細(xì)胞培養(yǎng)的主要步驟包括:
?一、剝離組織,去除外膜、結(jié)締組織等?:將組織從動(dòng)物體中取出,并去除可能存在的外膜或結(jié)締組織等雜質(zhì)。
二、?洗滌后將組織剪成1mm左右的小塊?:使用生理鹽水或其他適當(dāng)?shù)木彌_液洗滌組織,然后將其剪成約1mm大小的小塊。
三、?用0.1%~0.2%的消化?:將剪碎的組織塊加入含有0.1%~0.2%的緩沖液中,進(jìn)行消化。消化時(shí)間可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)需求選擇熱消化(37℃)或冷消化(4℃),熱消化時(shí)間短,冷消化時(shí)間長(zhǎng)但條件更溫和。
?四、吹打分散后,過濾、計(jì)數(shù)?:將消化后的細(xì)胞吹打到一個(gè)離心管中,然后過濾、計(jì)數(shù)。
五、?按30萬/毫升分瓶培養(yǎng)?:將計(jì)數(shù)后的細(xì)胞按30萬/毫升的濃度分瓶培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)操作:
收貨處理取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)
傳代密度細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù)可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)
傳代比例傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿
傳代方法:
1.吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4.待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。
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