亚洲麻豆一区二区三区-国产亚洲av午夜在线路线-日韩大尺度激情在线观看-激情亚洲精品人妻少妇

產(chǎn)品目錄   Product catalog
聯(lián)系我們   Contact
搜索   Search
技術(shù)文章   Article首頁>>技術(shù)文章>>??谔阋卟《竞臀鞴匣ㄈ~病毒

牛口蹄疫病毒和西瓜花葉病毒

點擊次數(shù):1223 更新時間:2016-03-09

    將純化的西瓜花葉病毒(Watermelon mosaic virus,WMV)制劑免疫BALB/c小鼠,用SP2/0骨髓瘤細胞與經(jīng)西瓜花葉病毒免疫的BALB/c小鼠的脾細胞融合,有限稀釋法克隆和間接ELISA法篩選出1株穩(wěn)定分泌西瓜花葉病毒單克隆抗體的雜交瘤細胞株6C6。用間接ELISA方法對所獲得的雜交瘤細胞株進行亞型鑒定為IgG1。間接ELISA方法測定腹水效價為1∶105。

    以單克隆抗體為包被抗體、多克隆抗體為檢測抗體的TAS-ELISA試劑盒與引自ATCC的西瓜花葉病毒毒源PV-27、PV-379、PV-394、PV-511分離物均有反應(yīng),與同屬的馬鈴薯A病毒(Potato virus A)、萵苣花葉病毒(Lettuce mosaicvirus virus)、李痘病毒(Plum pox virus)不發(fā)生交叉反應(yīng),與同屬的番木瓜環(huán)斑病毒呈弱陽性反應(yīng)口蹄疫(Foot and Mouth Disease, FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus, FMDV)引起的以感染偶蹄動物為主的急性、熱性、高度傳染性疫病。該病的發(fā)生和流行嚴重危害畜牧業(yè)的健康持續(xù)發(fā)展,造成巨大的經(jīng)濟損失,該病被世界動物衛(wèi)生組織列為必須通報的多種動物共患傳染病之一。細胞

    從2005年起國內(nèi)不斷發(fā)生??谔阋?目前面臨著Asia 1型口蹄疫的持續(xù)危害、O型FMDV的復(fù)發(fā)感染、新型毒株A型的侵襲風(fēng)險。因此,國內(nèi)口蹄疫的防控任務(wù)艱巨。我國防控FMD主要采取疫苗免疫和抗體監(jiān)測為主的綜合防控政策,通過接種疫苗提高畜群整體抗體水平來預(yù)防口蹄疫的感染和傳播。因此??谔阋吒腥镜目焖僭\斷、免疫效果評價、自然感染和疫苗免疫的鑒別診斷成為防控口蹄疫的關(guān)鍵技術(shù)。
    本研究通過pPROEXTM HTb表達載體在大腸桿菌DH5α中成功表達了FMDV的vp2基因,獲得大小為35ku的融合蛋白,Western blot證實目的蛋白可與FMDV 5種血清型的牛陽性血清發(fā)生特異性反應(yīng)。以此純化蛋白為抗原建立了牛FMDV VP2蛋白間接ELISA方法。特異性試驗表明,該抗原不與常見的7種牛病陽性血清發(fā)生交叉反應(yīng)。檢測非免疫無口蹄疫地區(qū)牛陰性血清特異性為100%;檢測感染血清敏感性為97.3%;與4種商品化試劑盒比較檢測O-Asia 1二價滅活苗免疫牛血清364份,符合率分別為69.0%、95.0%、90.4%和86.8%。試驗結(jié)果表明建立的ELISA方法可用于??谔阋吒腥竞兔庖呖贵w檢測。本研究利用實驗室融合表達的3B表位串聯(lián)肽(8BF)為檢測抗原建立的間接ELISA為基礎(chǔ),優(yōu)化組裝了一種特異、敏感的間接ELISA試劑盒。
    通過檢測大量未免疫、免疫健康牛血清和感染牛血清,確定了判定標準:S/P≥0.3,陽性;0.2≤S/P<0.3,可疑;S/P<0.2,陰性。8BF-ELISA試劑盒檢測NSP抗體持續(xù)期試驗表明,自然感染牛3B表位肽感染后10個月仍為陽性。與3種商品化試劑盒比較檢測101份臨床樣本,和Ceditest? FMDV-NS ELISA、3ABC-I-ELISA符合率高達95%;與3ABC-I-ELISA進一步比較檢測528份不同背景的牛血清,總符合率為94.5%(499/528)。大規(guī)模檢測不同來源的6個牛場共2026份臨床牛血清,部分牛群全部陰性,大多數(shù)牛群含有陽性牛,陽性率從3%到17%不等,個別感染牛群陽性率高達72.2%。8BF-ELISA試劑盒方便、安全、實用,特異性和敏感性高,用于鑒別診斷牛FMD自然感染和疫苗免疫,為FMD綜合防控提供了。細胞

上一篇 細胞的十個訣竅 下一篇 ELISA試劑盒容易操作失誤的地方

021-69985169
13611928337

環(huán)保在線

推薦收藏該企業(yè)網(wǎng)站
武隆县| 康马县| 安多县| 舒兰市| 米脂县| 滦平县| 博乐市| 平阳县| 荆门市| 海城市| 重庆市| 宜兰市| 溧阳市| 大渡口区| 屏山县| 定远县| 韶关市| 平乐县| 哈密市| 太仆寺旗| 改则县| 时尚| 尤溪县| 历史| 长兴县| 南阳市| 侯马市| 莆田市| 漾濞| 丘北县| 水城县| 鄂州市| 南城县| 新竹县| 昌江| 达拉特旗| 田林县| 玛沁县| 新化县| 即墨市| 海丰县|